ClpXP蛋白复合物对沙门氏菌囊泡结构稳定性的影响初探

作者：肖金雨; 娄莉萍; 李瑞; 何流; 唐田^*

来源：现代预防医学, 2021, 48(04): 719-723.

• 鼠伤寒沙门氏菌
• clpP基因
• 沙门氏菌囊泡

目的初探ClpXP蛋白复合物是否会对沙门氏菌囊泡(Salmonella-containing vacuole, SCV)结构稳定性产生影响。方法 (1)将表达绿色荧光蛋白的质粒(pGEX-6P-1-sf-GFP)通过电转化方式导入野生型鼠伤寒沙门氏菌TT-1(Wild-type)及敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-16(ΔclpP TT-1),分别获得表达绿色荧光蛋白的野生型鼠伤寒沙门氏菌TT-84(pGEX-6P-1-sf-GFP TT-1)和敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-85(ΔclpP p GEX-6P-1-sf-GFP TT-1);(2)将构建好的菌株以100∶1的感染复数感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,于感染后2 h和6h收集细胞进行免疫荧光染色,采用激光共聚焦显微镜观察并计数SCV内部和外部的细菌数量,计算逃逸率。结果感染2 h和6 h后,敲除了clpP基因的鼠伤寒沙门氏菌TT-85(ΔclpP p GEX-6P-1-sf-GFP TT-1),其SCV逃逸率显著高于野生型鼠伤寒沙门氏菌。结论 ClpXP蛋白复合物对SCV的结构稳定性具有显著影响。

• 单位
  北京市肿瘤防治研究所; 四川大学; 公共卫生学院