Fat1通过细胞外调节蛋白激酶信号通路抑制食管鳞癌细胞增殖

作者：杨斌; 张云魁; 叶永菁; 刘陶东; 彭胜祖; 张荣生^*

来源：中华肿瘤杂志, 2021, 43(05).

• 食管鳞癌
• Fat1
• 细胞增殖
• 细胞外调节蛋白激酶信号通路

目的探讨Fat1对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖能力的影响及其机制。方法以Plko.1-puro-GFP-shRNA-Fat1质粒转染KYSE450细胞, 应用实时定量PCR检测Fat1敲低效率。采用四甲基偶氮唑蓝法检测Fat1和细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路抑制剂U0126对KYSE450细胞增殖能力的影响, 平板克隆实验观察Fat1对ESCC细胞克隆形成能力的影响, 活细胞动态观察细胞周期, Western blot方法检测相关靶蛋白的表达。通过裸鼠体内成瘤实验检测KYSE450细胞敲低Fat1后对移植瘤生长的影响, 免疫组化方法检测肿瘤组织中相关蛋白的表达。结果 Fat1sh1组和Fat1sh2组细胞中Fat1敲低效率分别为(77.1±6.9)%和(77.7±7.1)%。与对照组相比, Fat1sh1组和Fat1sh2组细胞增殖明显加快(P<0.05), 细胞中p-ERK1/2的表达明显增加。经U0126处理后, Fat1敲低促进KYSE450细胞增殖的作用消失, 细胞中p-ERK1/2的表达下降到与对照组相近的水平。对照组的细胞克隆数为(72±8)个, Fat1sh1组和Fat1sh2组分别为(155±28)个和(193±9)个, 均高于对照组(均P<0.05)。对照组细胞分裂1次的时间为(1 622±32)min, Fat1sh1组细胞分裂1次的时间为(1 408±29)min, 比对照组明显缩短(P<0.05)。裸鼠成瘤实验显示, Fat1敲低组比对照组裸鼠移植瘤增长速度快, 接种后4周, 对照组和Fat1敲低组瘤体重量分别为(0.224±0.028)g和(1.532±0.196)g, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Fat1可通过抑制ERK信号通路进而抑制ESCC细胞增殖。

• 单位
  山西省肿瘤医院