人肝癌特异性HSV-TK/GCV重组腺病毒相关病毒质粒的构建与研究

作者：李志辉; 严律南; 赵永恒; 刘智敏; 刘自明; 李玉

来源：中国普外基础与临床杂志, 2004, 11(03): 234-237.

DOI：10.3969/j.issn.1007-9424.2004.03.018

• 靶向基因治疗
• 腺病毒相关病毒
• 肝癌

目的　构建肝癌特异性HSV TK/GCV重组腺病毒相关病毒质粒并了解其在细胞内的表达。方法　以腺病毒相关病毒的质粒WAV2作为载体 ,将TK基因插在甲胎蛋白 (AFP)增强子 /白蛋白启动子 (AFP增强子/ALB启动子 )的调控基因的下游 ,重组成pWAV2 /AFP ALB/HYTK质粒载体。同时构建质粒载体pEGFP 1/AFP ALB。然后将上述两种不同载体分别转入AFP阳性表达的HepG2细胞株以及阴性表达的 772 1、SPC和 790 1细胞株。结果　绿色荧光蛋白只在AFP阳性表达的HepG2细胞株表达 ,采用PCR技术 ,以HSV TK的引物扩增所抽提的总DNA中 ,只有AFP阳性表达的HepG2细胞株扩增出了 710bp的DNA片段。结论　pWAV2 /AFP ALB/HYTK质粒载体在体外实验中具有很好的靶向性。

• 单位
  四川大学华西医院