伪狂犬活/灭活病毒接种小鼠诱导免疫效力及差异因子比较

作者：章晨昕; 于晓明; 侯立婷; 张元鹏; 乔绪稳; 侯继波; 黄克和; 郑其升; 陈瑾

来源：南京农业大学学报, 2022, 1-9.

• 伪狂犬病毒
• 小鼠模型
• 免疫效力
• 差异因子

[目的]为比较活/灭活病毒进入体内后对免疫系统活化的差异，为免疫增强剂的筛选和评价建立高效动物模型。本实验利用伪狂犬病毒（PRV）Bartha-K61株建立小鼠伪狂犬人工感染模型，筛选活/灭活病毒接种小鼠后免疫相关差异因子，为后续伪狂犬灭活疫苗免疫增强剂的筛选提供依据。[方法]将PRVBartha-K61活毒以不同剂量、不同的方式感染实验小鼠，通过计算小鼠存活率确定最佳感染剂量与感染方式；将筛选的最佳剂量的伪狂犬病毒活毒与相同剂量下灭活病毒按照前述筛选的最佳感染方式接种小鼠，利用ELISA试剂盒检测免疫7d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IFN-β和IL-6水平；利用PRVgBELISA检测免疫7d后小鼠血清PRV特异性gB抗体水平；利用灭活PRV作为特异性抗原进行淋巴细胞增殖实验并计算各组淋巴细胞增殖指数（SI）。[结果]在保证小鼠存活的前提下，6～8周龄小鼠的PRV的安全感染剂量为5×104TCID50；同等剂量下，相比于肌肉和腹腔注射，皮下注射为最安全的感染方式；同等病毒剂量的活毒和灭活病毒接种小鼠后，与灭活病毒组相比，活病毒感染小鼠7d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IFN-β水平显著升高（P＜0.001，P＜0.01，P＜0.01），与灭活病毒组相比活病毒组小鼠血清PRVgB特异性IgG抗体水平和淋巴细胞增殖指数（SI）也显著升高（P＜0.05， P＜0.001）；不同灭活方式间各细胞因子和SI差异不显著（P＞0.05）。[结论]本实验成功建立了小鼠伪狂犬人工感染模型，明确了活/灭活伪狂犬病毒接种小鼠后，机体早期存在与免疫相关差异因子，为后续免疫增强剂的评价筛选提供研究平台。

• 单位
  江苏省农业科学院; 南京农业大学