通管方含药血清抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症机制探讨

作者：李萍; 徐佳; 黄紫纯; 王淑婷; 匡继林^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 1-17.

• 输卵管炎性不孕
• 通管方
• 细胞凋亡
• PI3K/Akt
• ROS

目的：为了探究通管方治疗输卵管炎性不孕的细胞机制，选用脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激RAW264.7巨噬细胞体外模型，从细胞氧化应激ROS水平、细胞凋亡水平和PI3K/Akt信号通路探究通管方含药血清对LPS诱导RAW264.7细胞炎症的影响。方法：通过CCK-8检测通管方含药血清对细胞炎症的影响。将细胞分为对照组、LPS炎症细胞模型组和不同浓度的通管方含药血清处理LPS炎症细胞模型组。通过qPCR检测各组分细胞中白细胞介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素IL-6（Interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的mRNA表达水平。采用免疫荧光和western blot检测PI3K/Akt信号通路的磷酸化水平，同时检测细胞凋亡基因Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白水平。利用Hoechst 33342/PI染色和流式细胞术检测通管方含药血清对细胞凋亡的影响。利用DCFH-DA探针检测通管方含药血清对细胞ROS含量的影响。结果：（1）通管方含药血清减小LPS对细胞的损伤，具有剂量依赖性。（2）通管方含药血清降低LPS诱导的促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的产生。（3）通管方含药血清减少了LPS诱导的细胞内ROS产生。（4）通管方含药血清预处理激活了PI3K/Akt信号通路。（5）通管方含药血清促进了细胞凋亡。结论：通管方含药血清处理可以减少细胞损伤和炎症反应，并通过激活PI3K/Akt信号通路和促进细胞凋亡来保护细胞免受LPS的损伤，进一步减轻细胞炎症水平。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第二附属医院