二甲基亚砜和四氢呋喃对胃蛋白酶催化动力学和分子光谱的影响

作者：黎春怡; 黄卓烈; 李利佳; 巫光宏; 何平; 朱国辉

来源：高等学校化学学报, 2012, (05): 988-995.

• 胃蛋白酶
• 二甲基亚砜
• 四氢呋喃
• 动力学
• 光谱 Pepsin
• Dimethyl sulfoxide
• Tetrahydrofuran
• Kinetics
• Spectrum

为了研究二甲基亚砜(DMSO)和四氢呋喃(THF)对胃蛋白酶(Pepsin,PP)催化活性的影响及其作用本质,测定了在这两种有机溶剂的作用下胃蛋白酶的催化活性、动力学参数、紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的变化.结果表明,体积分数为9%的DMSO使PP活性提高83.4%;而体积分数为1%的THF只能使PP活性提高3.59%.在盐酸溶液中,PP的动力学参数Km=2.22 mg/mL,vmax=1.1×106U/mg Pro;在9%DMSO中,其Km=1.50 mg/mL,vmax=0.5×106 U/mg Pro;在1%THF中的Km=1.91 mg/mL,vmax=0.51×106U/mg Pro.9%DMSO强烈抑制PP分子肽键的紫外吸收,而对芳香族氨基酸无影响;1%THF则对PP的紫外吸收光谱影响不大.9%DMSO和1%THF都使PP的紫外差示光谱出现明显的负吸收峰和正吸收峰.9%DMSO使酶分子的荧光发射峰向短波方向移动1 nm;而1%THF则对其无影响.实验结果表明,在9%DMSO和1%THF中,PP分子的立体构象发生了变化,使酶分子的Km下降,酶分子对底物的亲和力有所升高,从而导致酶分子的催化活性有不同程度的提高.

• 单位
  茂名职业技术学院; 华南农业大学