葛根芩连汤抑制TNF-α诱导的Caco-2细胞氧化损伤配伍规律研究

作者：林川; 董文敏; 张倩芸; 刘王振祖; 梁琨; 王新宏; 安叡^*

来源：中草药, 2022, 53(20): 6492-6499.

• 葛根芩连汤
• 葛根
• 配伍规律
• 氧化应激
• 结肠癌细胞

目的 探讨葛根芩连汤缓解肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人结肠癌Caco-2细胞氧化应激损伤作用及其配伍规律。方法 将Caco-2细胞随机分为对照组、TNF-α(80μg/L)组、小檗碱（6.73μg/mL）组及葛根芩连汤配伍组（全方组、去甘草组、去葛根组、葛根甘草组和黄芩黄连组，18.75μg/mL）。除对照组外，其余各组细胞给予TNF-α预处理2 h，再给予相应药物处理24 h。MTT检测Caco-2细胞活力；流式细胞术检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平；比色法检测细胞中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平；qRT-PCR和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、还原型辅酶I/II醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1]和血红素氧合酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)m RNA和蛋白表达；荧光显微镜观察Nrf2蛋白入核情况。结果 5.0～25.0μg/mL的含药培养基和10～80μg/L的TNF-α对Caco-2细胞活性无明显影响。与TNF-α组比较，各给药组Caco-2细胞ROS水平显著降低（P<0.01）；除去葛根组和黄芩黄连组外，其余各组MDA水平显著降低（P<0.01）,GSH水平明显升高（P<0.01）；除去葛根组外，其余各给药组Nrf2基因表达明显升高（P<0.01），全方组和去甘草组NQO1基因表达明显升高（P<0.05、0.01），全方组和葛根甘草组HO-1基因表达明显升高（P<0.05、0.01）；除黄芩黄连组外，其余各组Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高（P<0.01）；除去葛根组和黄芩黄连组外，其余各组NQO1蛋白水平显著升高（P<0.05、0.01）,Nrf2蛋白入核明显增加（P<0.05、0.01）。结论 缺少葛根对葛根芩连汤抑制Caco-2细胞氧化应激损伤有较大影响。

• 单位
  上海中医药大学; 复旦大学附属浦东医院