摘要

目的 中药复方药干预肝癌皮下瘤模型在中医药研究肝癌体内实验中越来越多,是中医科研工作者的研究肝癌的重要手段。适宜的细胞悬液注射量、细胞悬液注射浓度、参药介质、给药的中药复方浓度等细节贯穿整个造模和干预的过程,直接影响中药复方的干预效果,是中药复方体内实验研究取得成功的细节和必备点。基于课题组在进行养营活血汤干预肝癌皮下瘤模型的过程中查阅相关文献及制备方法,对肝癌皮下瘤造模及养营活血汤干预制备模型进行详细的梳理,并提出一些见解,以飨同道。方法 40只裸鼠BALB/c随机分成4组,每组10只。第1组10只裸小鼠注射密度为1×107个/mL0.2mL混合基质胶的细胞悬液;第2组10只裸小鼠注射密度为1×107个/mL0.1mL混合基质胶的细胞悬液;第3组10只裸小鼠注射细胞密度为1×106/mL0.1mL氯化钠溶液混悬的细胞悬液;第4组10只裸小鼠注射细胞密度为1×106 0.1mL混合基质胶注的细胞悬液。其中第1组与第2组注射量不同做对比;第2组与第3组不同浓度做对比;第3组与第4组不同介质做对比;细胞悬液分别皮下注射于裸鼠右腋,期间观察肿瘤大体特征、成瘤时间、成瘤率、成瘤大小、成瘤大小差异等,病理切片及电镜下观察肿瘤病理学特征。造模成功后使用中药复方养营活血汤干预皮下瘤模型7d,期间观察小鼠肿瘤增大速度趋势、小鼠状态等。结果 第2组中当每个注射点细胞悬液浓度为1×107时混合基质胶皮下注射0.1mL时,成瘤时间相对较短,8d成瘤率90%,成瘤差异较小,其8d成瘤最大直径平均值长度为(0.98±0.88)cm。养营活血汤干预7d后,小鼠状态较第1组好,其肿物增长趋势在合适区间内。结论 本实验4种方法均成功建立了H22肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,当每个注射点H22悬液浓度为1×107时混合基质胶皮下注射0.1mL时(第2组),该组模型成瘤率高,瘤体形状较规则、实验鼠皮下瘤大小较一致,更适合笔者一周左右的中药复方干预。第1组造模后皮下瘤肿物平均最长直径过大超过合适区间内,在干预期间7d内小鼠死亡率高,第3、4组皮下瘤模型成瘤速度慢,可能相对于第2组而言更适合较长期的中药复方干预。此次造模探究为研究短期中医干预措施提供了较为理想的动物模型。