摘要
目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对高糖环境下正常人肾小管上皮HK-2细胞株转分化的影响及其可能机制。方法将体外培养的HK-2细胞按随机数字表法分为以下7组:空白组、高糖组、高渗组、高糖+低浓度ATRA组、高糖+中浓度ATRA组、高糖+高浓度ATRA组、Rho激酶抑制剂Y27632干预组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞RhoA及ROCK1mRNA表达水平,采用细胞免疫荧光检测高糖环境下HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及E-钙黏蛋白的表达变化。结果 RT-PCR结果显示:空白组与高渗组RhoA及ROCK1mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);高糖组RhoA及ROCK1mRNA表达水平较空白组、高渗组高,差异均有统计学意义(P<0.05);予以ATRA或Y27632干预后,RhoA及ROCK1mRNA表达较高糖组减少,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈现ATRA浓度依赖性。相关性分析示,高糖组及各ATRA干预组RhoA mRNA与ROCK1mRNA表达水平呈正相关(P<0.05)。细胞免疫荧光检测结果显示:空白组与高渗组α-SMA及E-钙黏蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);高糖组α-SMA表达水平较空白组高,E-钙黏蛋白表达水平较空白组低,差异均有统计学意义(P<0.05);予以ATRA或Y27632干预后,α-SMA表达明显减少,E-钙黏蛋白表达明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ATRA可部分逆转高糖环境下HK-2细胞转分化的过程,其机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。
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