羟基积雪草苷通过NF-κB信号通路调控MMP-13的表达抑制佐剂性颈椎RA大鼠的炎性骨破坏的实验硏究

作者：喻伟光; 田振峰; 李彦敏^*; 梁丙寅; 郭尔斐

来源：医学动物防制, 2022, 38(04): 382-389.

• 类风湿关节炎
• 羟基积雪草苷
• NF-κB信号通路
• 基质金属蛋白酶
• 骨破坏

目的 利用大鼠造模研究羟基积雪草苷(madecassoside, MC)如何通过调节NF-κB信号通路抑制基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的表达，以相应达到抑制颈椎类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)大鼠的炎性骨破坏的目的。方法 利用双荧光素酶报告基因分析法(Flow Sight)测量MC对转录因子NF-κB信号通路的启动子结合活性的影响，同时通过酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测MC通过调控MMP-13对颈椎大鼠RA的炎性因子分泌的影响。通过染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)进一步研究MC对NF-κB信号通路与MMP-13的影响。结果 RA-FLS细胞经过MC治疗处理后，与对照组相比，CD4+/CD8+细胞比值由(1.56%±0.14%)上升到(3.45%±0.25%),CD4+T淋巴细胞由(8.56%±0.11%)上升到(22.43%±0.15%),CD8+T淋巴细胞由(6.28%±0.13%)上升到(10.11%±0.21%),与对照组相比，差异均有统计学意义(t=2.032,P<0.05)。同时实验结果显示，经过MC处理24 h和48 h后，IL-2、IL-α和IFN-γ的分泌表达浓度从10～20显著上升到25～60(t=2.054,P<0.05)。IL-1β浓度固定在10 ng/ml,随着MC浓度从10μmol/L上升到30μmol/L,MMP-13及MMP-13与NF-κB启动子浓度与对照组相比差异有统计学意义(t=2.014,P<0.05)。结论 MC通过下调NF-κB信号通路以达到抑制MMP-13的表达，同时MC通过上述免疫调节及交叉调控以达到抑制颈椎RA-FLS的骨破坏作用。