基于PDS基因的番茄VIGS高效沉默体系的优化

作者：郭燕; 刘志达; 康立茹; 包婷婷; 杨旭; 赵君; 张之为^*

来源：作物杂志, 2023, (02): 46-50.

DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2023.02.007

• 番茄
• 病毒诱导的基因沉默
• 八氢番茄红素脱氢酶基因
• 沉默株率
• 优化

病毒诱导的基因沉默（VIGS）具有独特优势，被广泛应用于基因功能验证。高效基因沉默体系的建立和优化是对目标基因功能进行研究的前提和基础。以番茄品种money maker和携带八氢番茄红素脱氢酶（PDS）基因序列的TRV病毒载体为材料，研究了农杆菌不同OD值、不同侵染方法以及侵染后不同培养温度对PDS基因沉默株率的影响。结果表明，农杆菌OD值分别为0.50、1.00和1.50时，PDS基因的沉默株率分别为5%、13%和6%；当农杆菌OD值为1.0时，采用注射法、真空浸润法和注射处理24h后再进行真空浸润后的PDS基因沉默株率分别为13%、30%和15%；侵染后的培养温度对于基因沉默株率也有显著影响，在25℃时的沉默株率为13%,22℃时沉默株率达到46%。以上研究表明，农杆菌OD值为1.00时，注射24h后再进行真空浸润，接种后植株在22℃下生长能够提高番茄目标基因的沉默株率。

• 单位
  园艺与植物保护学院; 内蒙古自治区农牧业科学院; 内蒙古农业大学