Per2蛋白抑制β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的心肌细胞死亡

作者：李朋佳; 贾微微; 陆洁蓓; 马明霞; 周秀雅; 王宁; 原媛; 郭蕊; 牛晓辰; 王晓晖; 王丽^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(09): 898-905.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202110010

• 心肌细胞
• β1-肾上腺素受体自身抗体
• Per2
• 昼夜节律
• 细胞死亡

目的 探讨周期蛋白2(period 2,Per2)在β1-肾上腺素受体(β1-adrenergic receptor,β1-AR)自身抗体(β1-adrenergic receptor autoantibodies,β1-AA)诱导的心肌细胞死亡中的作用。方法 选取6～8周龄SD雄性大鼠16只随机分为主动免疫组[模型组，采用β1-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段(β1-AR-ECⅡ)对大鼠进行主动免疫]和对照组(同期注射Na2CO3等溶液),每组8只。8周时取大鼠血清，提纯β1-AA。购买H9c2心肌细胞，随机分为Control组、β1-AA组和β1-AR+β1-AA组，CCK-8法检测细胞存活率(n=8);Control组和β1-AA(1μmol/L)组细胞经地塞米松同步化4 h后，Western blot检测两组不同时间点心肌细胞Per2的表达，JTK＿CYCLE分析昼夜节律参数(n=11);分别采用慢病毒shPer2和Per2敲低或过表达心肌细胞中Per2的表达，RT-PCR和Western blot检测Per2的表达(n=6);在慢病毒敲低Per2(n=8)和过表达Per2(n=10)基础上，结合β1-AA处理，CCK-8法检测心肌细胞存活率。结果 CCK-8结果显示，β1-AA诱导H9c2细胞存活率明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示β1-AA显著抑制心肌细胞Per2蛋白的节律性表达(JTK＿CYCLE P>0.05),其中CT8和CT16降低最为明显(P<0.01)。慢病毒敲低Per2表达可引起心肌细胞存活率降低；在此基础上进行β1-AA处理，细胞存活率进一步降低(P<0.001)。而过表达Per2可明显逆转β1-AA诱导的心肌细胞存活率下降(P<0.001)。结论 Per2抑制β1-AA诱导的H9c2心肌细胞死亡。

• 单位
  山西医科大学; 基础医学院