圣草酚调控Akt/mTOR通路对胶质瘤细胞自噬的影响

作者：刘庆龙; 郑相如; 李文军^*; 刘松青^*

来源：天然产物研究与开发, 2023, 35(01): 13-21.

DOI：10.16333/j.1001-6880.2023.1.002

• 圣草酚
• 胶质瘤
• 自噬
• 增殖
• Akt/mTOR

为研究圣草酚对胶质瘤细胞自噬的影响，探讨其通过调控Akt/mTOR通路在胶质瘤自噬过程中的作用。本研究采用CCK8和细胞克隆形成实验检测圣草酚对胶质瘤细胞增殖的影响。构建GFP-mRFP-LC3B稳定表达的细胞株，圣草酚(100μmol/L)处理48 h,观察自噬小体的形成情况；然后分别用圣草酚(100μmol/L)、雷帕霉素(200 nmol/L)以及圣草酚(100μmol/L)+雷帕霉素(200 nmol/L)处理48 h后观察自噬流的情况。利用蛋白免疫印迹法检测圣草酚对自噬及Akt/mTOR通路相关蛋白表达水平的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型，观察圣草酚在体内对胶质瘤自噬过程的影响。实验结果显示，圣草酚能够显著抑制胶质瘤细胞的增殖，且呈时间—剂量依赖性(P<0.05)。圣草酚使胶质瘤细胞中绿色自噬小体明显增多，LC3Ⅱ、Beclin 1、ATG5蛋白表达上调。圣草酚处理GFP-mRFP-LC3B稳转细胞株48 h后呈亮黄色，且减弱了雷帕霉素对自噬流的促进作用，并上调P62蛋白的表达。此外，圣草酚可抑制p-Akt、p-mTOR的表达，但该作用被Akt激动剂740 Y-P逆转。体内实验结果同体外一致。说明圣草酚能够抑制胶质瘤细胞的增殖和自噬流，其影响自噬过程的作用机制可能与下调Akt/mTOR通路有关。

• 单位
  重庆医科大学