高压快速冷冻技术在两种培养细胞超微结构中的应用

作者：肖丽国; 李茵茵; 李红梅; 张雪晴; 贾旭东; 张勤奋

来源：电子显微学报, 2017, 36(02): 142-146.

• 高压快速冷冻
• 冷冻置换
• 化学固定
• McCoy细胞
• sf9细胞

高压快速冷冻(high-pressure freezing,HPF)能使样品在高压下毫秒内从室温降到液氮温度,所有分子瞬间固定在原位,随后启用冷冻置换(freeze substitution,FS),在低温下缓慢固定的同时用有机溶剂替代样品中的水分,从而保存样品的细微结构接近自然状态。本文使用高压快速冷冻/冷冻置换方法对草地贪夜蛾细胞(sf9细胞)和感染沙眼衣原体的小鼠成纤维细胞(McCoy细胞)进行电镜制样观察,同时对比传统化学固定两种细胞超微结构的差异。结果发现,利用HPF/FS技术,两种细胞中的膜结构、细胞骨架结构更能良好地保存,核膜、高尔基体和囊泡膜平滑完整,无皱缩或断裂,细胞形态更接近自然状态。

• 单位
  中山大学生命科学学院; 有害生物控制与资源利用国家重点实验室