苹果锈果类病毒实时荧光定量反转录PCR检测及其在苹果树体内的扩散转移规律

作者：郗娜娜; 李紫腾; 张静怡; 孟祥龙; 王亚南^*; 曹克强^*

来源：植物保护学报, 2020, 47(06): 1304-1312.

DOI：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2020.2020033

• 苹果锈果类病毒
• 实时荧光定量RT-PCR
• 病毒移动
• 症状差异

为明确苹果锈果类病毒(apple scar skin viroid,ASSVd)在苹果树体内的转移规律,本研究建立高灵敏度的实时荧光定量反转录PCR(real-time fluorescence quantitative reverse transcription PCR,RT-qPCR)方法,利用此方法检测该病毒在树体内的转移规律以及苹果果实上病毒积累量与症状的相关性。结果表明,本研究所建立的RT-qPCR检测技术能针对枝皮、果实、根组织中的ASSVd进行准确、灵敏的检测,检测灵敏度下限为41.00 fg/μL(相当于5.95×105copies/μL RNA);在嘎拉苹果树上接种ASSVd,2个月后植株各组织部位病毒积累量均较高,尤其是接种枝先端和树冠下层枝组,根部病毒积累量很少;接种4个月后,各组织部位病毒积累量下降,病毒在植株上部、下部和根部均匀分布;接种6个月后,在接种枝中下部和根部病毒积累量相对较高;接种8个月后,地上部各组织部位病毒积累量很低,主要集中在根部。在花脸症果实着色不同的果皮中ASSVd积累量差异显著,未着色果皮病毒积累量是着色果皮的4～40倍。表明ASSVd自果树枝干嫁接接种后,病毒先在接种枝中增殖,然后向根部转移,病毒的增殖和转移可能主要受寄主生长发育时期的影响,花脸病症状表现与病毒积累量密切相关。

• 单位
  河北农业大学