TNF-α对肠上皮细胞紧密连接蛋白表达的作用

作者：崔巍; 刘冬妍; 马力; 刘沛

来源：世界华人消化杂志, 2007, (16): 1788-1793.

• 肿瘤坏死因子-&alpha
• 紧密连接蛋白claudin-1
• Caco-2细胞
• 免疫荧光
• 免疫印迹
• 实时定量聚合酶链式反应 Tissue necrosis factor-&alpha
• Tight junction protein claudin-1
• Caco-2 cell
• Immunofluorescence
• Western blot
• Real-time quantity polymerase-chain reaction

目的:研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肠上皮细胞紧密连接蛋白claudin-1定位和表达的影响,探讨TNF-α增加肠上皮细胞屏障通透性的作用机制.方法:Caco-2细胞(20-30代)应用含有2 mmol/ L谷氨酰胺、20%胎牛血清的DMEM培养液培养7d,细胞生长达到融合后加入不同浓度的TNF-α(0,10,100μg/L)继续培养24h,提取细胞蛋白制备NP-40可溶性及不溶性蛋白框架,Western blot检测磷酸化和非磷酸化的claudin-1蛋白含量,并应用间接免疫荧光法检测claudin-1的定位,实时定量PCR技术检测claudin-1 mRNA的表达.结果:免疫荧光染色可...

• 单位
  中国医科大学附属第一医院; 中国医科大学