基于免疫分析的杏仁蛋白饮料中杏仁蛋白质定量方法研究

作者:张世伟; 赖心田; 王士峰; 黄静敏; 冯荣虎; 谭贵良; 刘垚; 杨国武
来源:河南农业科学, 2016, 45(04): 145-149.
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.04.033

摘要

为建立基于竞争酶联免疫分析(ELISA)的杏仁蛋白饮料中杏仁蛋白质定量方法,使用2-D电泳结合MALDI-TOF/MS鉴定了杏仁的高丰度蛋白,分离纯化了杏仁40 ku prunin蛋白α链,并以此作为抗原制备了抗杏仁蛋白单克隆抗体,使用该抗体建立了检测杏仁蛋白质的竞争酶联免疫分析方法。该方法以杏仁可溶全蛋白作为标准品,IC50为19.6μg/m L,线性范围为5.0~100μg/m L(R2=0.990)。该方法特异性良好,和其他可食种子蛋白质无交叉反应。检测植物蛋白饮料样品的检出限为0.6 mg/m L,相对标准偏差<10%。使用巴氏杀菌、超高温瞬时灭菌和高压灭菌的蛋白质平均回收率分别为96%、92%和81%。

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