酶解大豆蛋白的制备工艺研究及其在细胞培养中的应用研究

作者：郑荣; 何云富; 张邵博; 李倬; 冶眩青; 程浩; 丁功涛; 冯玉萍; 马忠仁; 李明生^*

来源：天然产物研究与开发, 2018, 30(09): 1627-1654.

DOI：10.16333/j.1001-6880.2018.9.026

• 酶解
• 非动物源性
• 大豆蛋白
• 细胞培养

采用两种非动物源性蛋白酶水解大豆蛋白,以水解度为指标,对不同比例4种酶两两组合测试其水解度,选出水解最佳用酶;在单因素试验基础上,采用正交试验对酶解大豆蛋白的工艺条件进行优化,并将产物进行动物细胞的生长进行检测。结果表明:复合蛋白酶与碱性蛋白酶以等比例进行混合,其水解效果最佳;水解最佳工艺为:温度60℃、p H值7. 0和酶/底物(E/S)=1∶4(质量比),水解时间为4 h,其水解度为43. 7%。将酶解产物培养BHK-21细胞,并与Hypep1510进行对比,细胞生长状态良好,其细胞密度在120 h时最大,为3. 96×105cells/mL,与Hypep1510相比,最大细胞密度并无明显差异,其倍增时间为26. 2 h,高于阴性对照组与阳性对照组,且细胞形态基本未发生改变,表明酶解大豆蛋白所的产物能够缩短细胞倍增的时间,且具有一定的促细胞生长作用,为其在动物细胞大规模培养中的应用提供了理论依据。

• 单位
  西北民族大学; 甘肃省动物细胞工程技术研究中心