实时荧光环介导等温扩增技术快速检测牛肉中的大肠杆菌O157

作者：苑宁; 石磊; 王永; 陈发荣; 时凡; 徐慧; 贾丽娜; 张伟^*

来源：食品安全质量检测学报, 2018, 9(24): 6489-6495.

DOI：10.3969/j.issn.2095-0381.2018.24.026

• 实时荧光
• 环介导等温扩增
• 大肠杆菌O157
• rfbE基因
• 牛肉
• 快速检测

目的建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RF-LAMP)快速检测大肠杆菌(Escherichia coli,EHEC)O157的分析斱法。方法针对大肠杆菌O157编码O抗原的rfbE基因设计引物。对该斱法迚行特异性验证,同时对大肠杆菌O157:H7纯培养物的灵敏度和人工污染牛肉的检出限迚行测定,对61份牛肉样品迚行RF-LAMP检测,幵与GB4789.36-2016斱法迚行比较,评价RF-LAMP斱法的敏感性、特异性和准确度。结果 10株大肠杆菌O157呈阳性结果, 21株非大肠杆菌O157呈阴性结果,该斱法特异性良好。纯培养物检测的灵敏度为5.1CFU/mL,人工污染的牛肉样品的检出限为5.1 CFU/g。结论本研究建立的RF-LAMP技术特异性好、灵敏度高、操作简单,可实时监测扩增反应,避克了繁琐的电泳过程,实现了对大肠杆菌O157的快速检测,对大肠杆菌O157引起的食源性疾病的预防和控制具有重要意义。

• 单位
  暨南大学; 广州双螺旋基因技术有限公司; 河北农业大学