miR-145/SMAD3轴在慢性阻塞性肺疾病中的作用和机制研究

作者：谢圆媛; ***^*; 赵莉; 薛鹏

来源：实用药物与临床, 2020, 23(12): 1074-1081.

DOI：10.14053/j.cnki.ppcr.202012004

• miR-145
• SMAD3
• 支气管上皮细胞
• P13K/Akt/mTOR
• 细胞炎症
• ECM降解

目的探讨miR-145通过SMAD3调节慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生及机制。方法检测延安大学附属医院有COPD的吸烟者、无COPD的吸烟者、无COPD的未吸烟者肺组织中miR-145、SMAD3的表达水平。用20%CEM处理支气管上皮细胞后,构建COPD的细胞模型,将miR-145 mimics/inhibitor转染该细胞后,通过ELISA方法检测细胞上清中IL-6、IL-8、IL-10表达水平,RT-PCR、Western blot检测SMAD3、IL-6、IL-8、IL-10和ECM降解相关蛋白MMP-9、EMMPRIN以及P13K、Akt、mTOR的表达,CCK-8法检测细胞的增殖情况。通过双荧光素酶报告基因实验检测SMAD3与miR-145的靶向关系,同时,将pEGFP-N1-SMAD3转染COPD模型细胞后,RT-PCR、Western blot检测IL-6、IL-8、IL-10、MMP-9、EMMPRIN及P13K、Akt、mTOR的表达。结果有COPD的吸烟者肺组织中miR-145低表达、SMAD3高表达;miR-145能够抑制COPD模型细胞IL-6、IL-8、IL-10的表达,促进MMP-9、EMMPRIN的表达;miR-145通过抑制P13K/Akt/mTOR通路的发生,抑制细胞的增殖;最后,双荧光素酶报告基因实验检测miR-145靶向SMAD3;过表达SMAD3后,能够促进IL-6、IL-8、IL-10、P13K、Akt、mTOR的表达,抑制MMP-9、EMMPRIN的表达。结论 miR-145抑制SMAD3的表达,从而抑制慢性阻塞性肺泡细胞炎症的发生,促进ECM的降解,通过抑制P13K/Akt/mTOR通路的发生抑制细胞的增殖,减轻COPD的发生。

• 单位
  延安大学附属医院