髓样细胞表达的触发受体1抑制LPS应激下巨噬细胞的自噬

作者：朱爱萍; 梁道淼; 粟青; 李莉芳; 贾哲; 贺丽萍; 任翔; 孙国瑛^*

来源：中国临床解剖学杂志, 2018, 36(06): 642-647.

DOI：10.13418/j.issn.1001-165x.2018.06.009

• 髓样细胞表达的触发受体-1
• 巨噬细胞
• 脂多糖
• 自噬

目的观察髓样细胞表达的触发受体1(TREM-1)对脂多糖(LPS)应激下巨噬细胞自噬相关基因表达的影响。方法观察LPS应激下的巨噬细胞TREM-1蛋白的表达。分别选用TREM-1的激动剂(MAB1187)和TREM-1的拮抗剂(LR12)作用于巨噬细胞,利用qPCR检测巨噬细胞自噬相关基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)mRNA的表达;采用Western Blot检测巨噬细胞TREM-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达;采用免疫荧光检测在LPS应激与TREM-1激活的情况下,巨噬细胞的自噬标志蛋白LC3表达。结果 LPS(400 ng/mL、1000 ng/mL)应激下巨噬细胞TREM-1蛋白表达明显增加;LPS(1000 ng/mL)作用巨噬细胞24 h,巨噬细胞TREM-1蛋白表达达到峰值。LPS应激的巨噬细胞自噬基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志分子LC3 m RNA表达均降低;当给予TREM-1拮抗剂后,巨噬细胞的ATG7、ATG5、ATG12、LC3 mRNA表达均升高,而采用TREM-1激动剂后,自噬基因表达被抑制。Western Blot检测结果显示,TREM-1可抑制LPS应激下巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达。免疫荧光检测表明TREM-1激动剂可使巨噬细胞胞内的LC3蛋白表达量减少。结论巨噬细胞胞膜上TREM-1激活后,可使巨噬细胞自噬减弱,提示LPS应激下的巨噬细胞TREM-1可能通过抑制巨噬细胞的正常自噬从而发挥炎症放大作用。

• 单位
  湖南师范大学树达学院; 基础医学院; 中南大学; 湖南师范大学