对新型冠状病毒核酸检测低基因扩增信号样本的再分析

作者：余娟平; 李志强; 李龙; 魏琦; 都伟杰; 毕真; 李芳云; 方琼; 陈浩; 陈良军; 康卫灵; 王智慧; 蔡维文; 殷梅梅; 方婷; 王倩倩; 梅圣学; 李强; 常中宝; 申梦来; 程雅婷; 李晓华^*

来源：中华临床实验室管理电子杂志, 2021, 9(04): 231-236.

• 冠状病毒科
• 实时聚合酶链反应
• 质量控制

目的回顾性检测和分析本实验室在新冠肺炎流行早期快速筛查检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸结果,总结检测失败经验供临床实验室参考。方法首先对50例咽拭子样本,分别用本实验室所用试剂A和亳州市疾控中心提供的试剂B进行实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)平行双盲检测,以评估本实验室用试剂A的可靠性。后续使用试剂A进行常规检测,发现37 250例样本中有1 354例检测结果异常,其中1 286例为检测扩增失败样本,68例为检测信号曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增的可疑样本。对检测结果异常的1 354例样本用试剂A进行复查,并对两次检测结果进行统计和分析。结果采用A和B两种试剂分别检测50例已知结果样本的结果符合率为96.0%(48/50),表明试剂A具有可靠性。用试剂A复检1 286例扩增失败样本,发现1 114例(86.63%)为阴性,25例(1.94%)单基因信号(15例ORF 1ab信号,10例N基因信号)曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增,147例再次核酸制备/检测失败(11.43%)。在68例检测信号曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增的可疑样本中,用试剂A复检57例单基因曲线末尾起跳样本,结果符合率为94.7%(54/57),其检出病毒阳性率为10.53%(6/57);复检另外11例双基因信号曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增样本(可疑),结果符合率为100%(11/11),其中检出病毒阳性率为81.82%(9/11)。结论荧光RT-PCR试剂盒A符合早期快速筛查病毒的实验室要求。检测时任何单基因或者双基因检测信号出现异常的末尾起跳时,必须进行重复检测才能保证结果的可靠和不漏检。同时,规范化的实验室操作和质量控制是保证操作精度和检测结果可重复的重要因素。

• 单位
  广州金域医学检验集团股份有限公司; 合肥金域医学检验实验室有限公司