基于CRISPR基因编辑系统抗番木瓜曲叶病毒的植物转化载体的构建

作者：龙欢; 赵辉; 王绪朋; 贾瑞宗; 贺萍萍; 孔华; 郭运玲; 郭安平^*

来源：热带作物学报, 2019, 40(10): 2022-2028.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2019.10.015

• 基因编辑
• 曲叶病毒
• 番木瓜
• 瞬时表达

双生科病毒具有毁灭性强、寄主多样、分布地域广等特点,一直是困扰世界农作物生产的一大难题。用物理和化学方法防治该类病毒不仅花费成本高,见效低,而且还可能对环境造成负面影响,因此用分子手段培育抗病品种才是有效途径之一。本研究结合最新的CRISPR/Cas9基因编辑技术和GoldenGate克隆技术,设计并构建了抗番木瓜曲叶病毒基因编辑串联多切点表达载体。表达载体转入农杆菌AGL1后经注射本氏烟草叶片进行瞬时表达,48h后通过激光共聚焦显微镜能观察到有绿色荧光的出现,定位的位置为细胞核与细胞质膜。本研究为番木瓜抗曲叶病毒研究提供理论基础。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 海南大学