miR-130b-3p和其靶基因在PCOS患者颗粒细胞中的表达研究

作者：秦妍; 史**; 张楠; 刘佳佳; 李伟伟

来源：现代医学, 2021, 49(09): 1022-1029.

• miR-130b-3p
• 多囊卵巢综合征
• 颗粒细胞
• Smad4

目的:探讨miR-130b-3p和其靶基因在多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞中表达的意义。方法:选取2019年10月至2020年6月于我院就诊且行体外受精/卵泡浆内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSIET)助孕治疗的35例PCOS患者作为PCOS组。另招募年龄、体质量指数(BMI)等相匹配的卵巢功能正常因男方因素或者单纯输卵管因素接受IVF/ICSI-ET助孕治疗的30例患者作为对照组。采用密度梯度离心法收集纯化颗粒细胞;利用生物信息学技术预测miR-130b-3p的下游靶基因;利用双荧光素酶实验验证miR-130b-3p的靶基因,在转染实验中将细胞分为miR-130b-3p模拟物组、miR-130b-3p抑制物组和各自的对照组;采用CCK8法检测细胞的增殖;采用流式细胞仪检测人卵巢颗粒细胞瘤细胞(KGN细胞)的凋亡指数;采用蛋白印迹法检测Smad4的表达水平。结果:PCOS组miR-130b-3p的表达水平(1.45±0.20)显著高于对照组(0.82±0.17)(P <0.05); KGN细胞miR-130b-3p的表达水平(2.30±0.19)显著高于人正常卵巢上皮细胞(ISOE80细胞)(0.98±0.05)(P <0.05); miR-130b-3p模拟物组的KGN细胞增殖活性显著高于其他3组,而凋亡率显著低于其他3组,均P <0.05。双荧光素酶实验证实,miR-130b-3p与Smad4具有靶向调节关系。PCOS组的Smad4蛋白的表达水平显著低于对照组,KGN细胞Smad4的蛋白表达水平显著低于ISOE80细胞,均P <0.05。结论:miR-130b-3p调节PCOS患者颗粒细胞的增殖和凋亡,参与PCOS的发病。