M2型肿瘤相关巨噬细胞参与胃癌细胞转移及免疫逃逸的机制研究

作者：陈华敏; 何志军; 涂伟; 吴晓明; 黄光钺^*

来源：局解手术学杂志, 2023, 32(09): 771-777.

• 胃癌
• M2型肿瘤相关巨噬细胞
• PD-L1
• 迁移
• 侵袭
• 免疫逃逸

目的 探究M2型肿瘤相关巨噬细胞（TAM）通过调控胃癌细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)表达影响肿瘤细胞转移和免疫抑制因子分泌的机制。方法 人单核细胞株THP-1经佛波酯（PMA）和白细胞介素-4(IL-4)诱导建立M2型TAM模型，免疫荧光染色检测M2型TAM表面标记物CD206的表达。将人胃癌细胞系MKN-45分为对照组（未经转染的MKN-45细胞）、siPD-L1组（将siPD-L1转染至MKN-45细胞）、M2组（在Transwell小室上室接种M2型TAM，下室接种MKN-45细胞）和siPD-L1+M2组（在Transwell小室上室接种M2型TAM，下室接种转染siPD-L1的MKN-45细胞）。RT-qPCR检测转染效果；免疫荧光染色和流式细胞术检测各组MKN-45细胞PD-L1的表达；划痕实验检测各组MKN-45细胞划痕愈合率；Transwell实验检测各组MKN-45细胞迁移与侵袭；ELISA测定各组MKN-45细胞培养液上清中血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 THP-1细胞经PMA与IL-4诱导后，细胞贴壁生长，形态多样且伸出伪足，细胞内CD206荧光染色强度明显增加，说明M2型TAM构建成功。转染siPD-L1的MKN-45细胞内PD-L1相对表达量降低，表示转染成功。与对照组比较，M2组的MKN-45细胞内PD-L1荧光强度增强，细胞表面PD-L1表达升高，划痕愈合率、细胞迁移及侵袭数目升高/增加，VEGF、TGF-β和IL-6含量也增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。与M2组比较，siPD-L1+M2组的MKN-45细胞内PD-L1荧光强度减弱，细胞表面PD-L1表达降低，划痕愈合率、细胞迁移及侵袭数目降低/减少，VEGF、TGF-β和IL-6水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 M2型TAM能够促进胃癌细胞迁移与侵袭，并增加免疫抑制因子分泌，从而促进肿瘤细胞转移及免疫逃逸，该作用可能与调控PD-L1表达有关。

• 单位
  海南医学院第二附属医院