LncRNA ZFAS1对NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响

作者：陈芹; 曹达魁; 高景蓬; 吴嘉晟; 高军^*

来源：中国临床药理学杂志, 2022, 38(22): 2702-2706.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.22.010

• 长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(LncRNA ZFAS1)
• 微小RNA-589-5p (miR-589-5p)
• NCI-H460细胞
• 增殖

目的 研究LncRNA ZFAS1调控肺癌NCI-H460细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的作用机制。方法 收集肺癌组织、癌旁正常组织、NCI-H460细胞和BEAS-2B细胞，通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析LncRNA ZFAS1、miR-589-5p的表达量。miRcode软件预测LncRNA ZFAS1和miR-589-5p的结合位点，进一步通过双荧光素酶报告基因确定两者的相关性。以细胞计数法-8(CCK-8)实验检测NCI-H460细胞增殖活力，以Transwell实验检测细胞侵袭数目，以流式细胞仪检测细胞凋亡率，以蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)通路蛋白表达。结果 NCI-H460细胞(3.02±0.98)和肺癌组织(2.34±0.67)中LncRNA ZFAS1表达量明显升高(P<0.01),NCI-H460细胞(0.34±0.03)和肺癌组织(0.23±0.01)中miR-589-5p的表达量明显降低(P<0.01)。ZFAS1 siRNA和siRNA NC组细胞增殖活力分别为(37.52±2.58)%,(62.38±3.55)%,细胞侵袭数目分别为(32.50±4.52),(83.50±5.86)个，差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。siRNA NC+8μg·mL-1顺铂组、ZFAS1 siRNA+8μg·mL-1顺铂组细胞凋亡率分别为(8.73±2.17)%,(20.06±1.85)%,差异有统计学意义(P<0.01)。LncRNA ZFAS1与miR-589-5p具有靶向结合位点。下调miR-589-5p激活了MAPK/ERK通路。inhibitor NC组、miR-589-5p inhibitor组、miR-589-5p inhibitor+U0126组细胞增殖活力分别为(63.18±3.39)%,(82.35±4.58)%,(60.27±3.93)%,细胞侵袭数目分别为(75.50±6.85),(135.50±5.83),(90.50±6.84)个，差异均有统计学意义(均P<0.01)。inhibitor NC+8μg·mL-1顺铂组、miR-589-5p inhibitor+8μg·mL-1顺铂组、miR-589-5p inhibitor+U0126+8μg·mL-1顺铂组细胞增殖活力分别为(38.25±2.78)%,(75.45±4.28)%,(42.85±5.87)%,细胞凋亡率分别为(12.59±4.15)%,(5.26±2.48)%,(11.06±2.45)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 LncRNA ZFAS1在肺癌细胞中表达上调且通过miR-589-5p激活MAPK/ERK通路调控NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性。