摘要

目的 探讨重楼皂苷Ⅱ对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及其可能的机制。方法 取对数生长期的肺癌A549细胞,分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入3、2、1μmol/L重楼皂苷Ⅱ及等量二甲基亚砜溶液,干预24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖能力(以细胞增殖活力表示),细胞划痕实验检测细胞迁移能力(以细胞迁移率表示),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(以侵袭细胞数表示),Western blotting法检测凋亡相关蛋白[Cleave-Caspase-3、Bax、Bcl-2、基质金属蛋白酶2(MMP-2)]表达,实时荧光定量PCR法检测miR-16-5p表达。取对数生长期的A549细胞,分为miR-16-5p inhibitor组和miR-16-5p NC组和阴性对照组,miR-16-5p inhibitor组和miR-16-5p NC组分别转染含有绿色荧光标记的miR-16-5p inhibitor和miR-16-5p inhibitor NC,并加入2μmol/L重楼皂苷Ⅱ溶液,阴性对照组未进行细胞转染并加入等量二甲基亚砜溶液,干预24 h,参照上法检测miR-16-5p、凋亡相关蛋白表达及细胞生物学行为。结果 高、中、低浓度组和对照组细胞增殖活力、细胞迁移率及侵袭细胞数均依次升高,组间两两比较P均<0.05。与对照组比较,高、中、低浓度组Cleave-Caspase-3、Bax、miR-16-5p表达均升高,Bcl-2、MMP-2蛋白表达均降低,以高浓度组变化最明显(P均<0.05)。miR-16-5p inhibitor组、miR-16-5p NC组和阴性对照组miR-16-5p相对表达量分别为0.07±0.05、1.57±0.07、1.00±0.03,miR-16-5p inhibitor组低于miR-16-5p NC组、阴性对照组(P均<0.05)。miR-16-5p NC组细胞增殖活力、细胞迁移率、侵袭细胞数及Bcl-2、MMP-2蛋白表达均低于miR-16-5p inhibitor组和阴性对照组,Cleave-Caspase-3、Bax蛋白表达均高于miR-16-5p inhibitor组和阴性对照组(P均<0.05),miR-16-5p inhibitor组和阴性对照组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 重楼皂苷Ⅱ可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与升高miR-16-5p表达有关。