摘要
目的 探讨维生素E琥珀酸酯(VES)处理人胃癌SGC-7901细胞过程中自噬对细胞抗氧化功能的影响。方法 不同剂量(0、5、10、15、20μg/ml) VES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Western blot检测自噬标志蛋白LC3和Beclin-1的表达情况,Real-time PCR检测细胞内抗氧化酶SOD、CAT和GPX mRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平;RNA瞬时干扰阻断自噬关键基因BECN-1基因的表达后,以20μg/ml VES处理人胃癌SGC-7901细胞24h,Real-time PCR检测抗氧化酶SOD、CAT和GPX mRNA的表达情况,ELISA检测GSH水平。结果 与对照组相比,随着VES作用剂量的增加,Beclin-1蛋白表达逐渐增高,可观察到LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化增加;Real-time PCR检测显示SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达减少,ELISA显示细胞内GSH水平降低。阻断自噬关键基因BECN-1基因后,SOD、CAT和GPX等抗氧化酶的mRNA表达进一步减少(P<0.05),ELISA显示GSH水平进一步降低(P<0.05)。结论 VES可诱导人胃癌SGC-7901细胞发生自噬并降低细胞内抗氧化物质的水平,抑制自噬后抗氧化酶的表达水平进一步降低,提示自噬可缓解VES引起的细胞氧化应激。[营养学报,2021,43 (6):550-555]
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单位华北理工大学; 公共卫生学院