摘要

为了在乳酸菌中表达H9N2亚型禽流感病毒(AIV) NP和M2基因并检测其反应原性,先以pMD19-T-M2质粒作为模板,采用PCR方法克隆M2全长基因,然后将M2基因亚克隆入p SIP409-pgsA’-NP质粒中,构建重组质粒pSIP409-pgsA’-NP-M2,再将重组质粒pSIP409-pgsA’-NP-M2通过电转化的方法转入植物乳杆菌Lb.plantarum NC8中,制备重组菌NC8-p SIP409-pgsA’-NP-M2并诱导表达,最后通过流式细胞术、免疫荧光和免疫印迹技术验证。结果表明,重组菌NC8-pSIP409-pgsA’-NP-M2能够经诱导表达NP-M2融合蛋白,并且与兔源NP单克隆抗体和抗M2的小鼠血清具有反应原性。试验为后续研究禽流感广谱口服疫苗奠定了基础。