抗菌肽Shiva 1a基因真核表达载体的构建及序列分析

作者：宫晓炜; 郑福英; 蔺国珍; 曹小安; 王光华; 周继章; 才学鹏

来源：中国畜牧兽医, 2011, (12): 96-100.

• 抗菌肽
• Shiva 1a
• 真核表达
• 序列分析 antimicrobial peptide
• eukaryotic expression
• sequence analysis

为了探讨天蚕类抗菌肽在动物早期抗感染过程中的作用机理,本研究以Shiva1a基因的成熟肽为模板设计4条引物,利用重叠延伸PCR技术获得目的基因,并在C端添加6×His的标签。将此序列与真核表达载体pIRES2-EGFP进行重组,构建pIRES2-EGFP-Shiva 1a重组表达质粒,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染将重组质粒转染到CHO-K1细胞,荧光显微镜观察其表达情况。通过生物信息学软件对抗菌肽Shiva 1a的二级结构和三级结构进行预测分析。其结果为进一步研究Shiva 1a的抗菌活性和在动物抗病育种方面的应用奠定了基础。

• 单位
  农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所