氧化型低密度脂蛋白对人主动脉平滑肌细胞生长的影响

作者：康永波; 蔡悦; 李昱; 杜余辉

来源：西部医学, 2020, 32(03): 328-333.

• 氧化型低密度脂蛋白
• 人主动脉平滑肌细胞
• 总胆固醇
• 胆固醇酯
• 细胞活力

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用不同时间对人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMC)生长的影响,分析其诱导HA-VSMC形成泡沫细胞的最适诱导浓度和时间,为开展动脉粥样硬化(AS)及相关疾病研究建立体外细胞模型提供依据。方法使用不同浓度的ox-LDL(15μg/mL和20μg/mL)分别处理HA-VSMC不同时间(36、48、60、72、84、96 h),通过测定细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量以及使用油红O染色观察细胞内脂质空泡来检测泡沫细胞形成的情况;用噻唑蓝比色实验(MTT法)检测细胞活力变化的情况。结果细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量、胆固醇酯/总胆固醇的比值以及脂质空泡随着ox-LDL浓度和处理时间的增加而增加。15μg/mL ox-LDL作用60 h细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值超过50%且脂质空泡形成,表明泡沫细胞形成;同时,与对照组相比,15μg/mL ox-LDL作用36、48 h对细胞增殖有促进作用,细胞活力显著增加(P<0.05);处理60、72和84 h细胞活力未发生显著性变化;处理96 h对细胞增殖有抑制作用,细胞活力显著下降(P<0.05)。表明15μg/mL ox-LDL处理细胞建模不成功。20μg/mL ox-LDL作用48 h细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值超过50%且脂质空泡形成,表明泡沫细胞形成;同时,与15μg/mL ox-LDL处理的HA-VSMC相比,20μg/mL ox-LDL处理细胞36 h细胞活力显著降低(P<0.01),处理48、60、72和84h细胞活力显著增加(P<0.05),处理96 h细胞活力无显著变化。20μg/mL ox-LDL处理细胞48、60、72和84 h建模成功。结论浓度为20μg/mL的ox-LDL处理HA-VSMC细胞48 h细胞活力增加最为显著,其可作为建立AS体外细胞模型的最佳诱导时间和浓度。

• 单位
  山西医科大学; 昆明理工大学; 基础医学院