2-氯乙醇暴露对BV2细胞活化的影响

作者：高怡; 罗欣; 杨金翰; 赵凤红; 王高阳; 金亚平^*

来源：中国职业医学, 2021, 48(06): 648-654.

DOI：10.20001/j.issn.2095-2619.20213888

• 1,2-二氯乙烷
• 2-氯乙醇
• 小胶质细胞
• 细胞活化
• 炎症反应
• 炎症因子
• 磷酸化

目的 探讨2-氯乙醇在BV2细胞活化中的作用与机制。方法 将对数生长期BV2细胞随机分为4组，根据细胞活力测定结果，分别采用浓度为0、40、80和160 mmol/L的2-氯乙醇刺激后，于正倒置一体显微镜下观察细胞形态；以实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小胶质细胞活化标记物离子钙接头蛋白1(Iba1)和分化抗原11b(CD11b)mRNA的表达；以免疫印迹法检测IBA1和CD11b蛋白的相对表达水平，并检测BV2细胞的p-p65和p65在细胞核、细胞质中的表达情况；以酶联免疫吸附测定法检测细胞培养基上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平；以免疫荧光法检测BV2细胞内p65核内移位情况。结果 与对照组比较，40、80和160 mmol/L剂量组BV2细胞呈炎症激活状态，且激活的程度随2-氯乙醇浓度增加而加重。与对照组比较，80和160 mmol/L剂量组BV2细胞中Iba1 mRNA相对表达水平均升高(P值均<0.05),160 mmol/L剂量组BV2细胞中CD11b mRNA相对表达水平升高(P<0.05),且3个剂量组BV2细胞中IBA1和CD11b蛋白相对表达水平均上调(P值均<0.05),以160 mmol/L剂量组最高(P值均<0.05)。与对照组比较，3个剂量组BV2细胞分泌的TNF-α水平呈剂量依赖性升高(P值均<0.05),IL-10水平均下降(P值均<0.05);与40 mmol/L剂量组和对照组比较，160 mmol/L剂量组BV2细胞分泌的IL-6水平均升高(P值均<0.05),TGF-β1水平均下降(P值均<0.05)。与对照组比较，80和160 mmol/L剂量组BV2细胞中p-p65蛋白相对表达水平均升高(P值均<0.05),且3个剂量组BV2细胞中细胞核p65蛋白相对表达水平均升高(P值均<0.05),细胞质中p65蛋白相对表达水平均下降(P值均<0.05),浆核比均下降(P值均<0.05)。免疫荧光检测结果显示，随着2-氯乙醇刺激浓度的增加，细胞核位置附近p65荧光强度逐渐增强。结论 2-氯乙醇刺激可导致BV2细胞形态改变，增加小胶质细胞活化标记物IBA1和CD11b的表达。2-氯乙醇刺激可导致BV2细胞发生一定程度的剂量依赖性增强的炎症反应。2-氯乙醇刺激可促进BV2细胞p65磷酸化与入核。

• 单位
  中国医科大学; 公共卫生学院