蛋白质磷酸酶4催化亚基调控乙型肝炎病毒X蛋白水平及生物学功能

作者：王秋然; 郑艺俐; 吴天民; 陈媛媛; 廖文君; 张璐; 林旭; 吴琼^*; 陈婉南^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(07): 509-516.

DOI：10.3760/cma.j.cn112309-20230615-00173

• HBx
• 蛋白质磷酸酶4催化亚基
• 去磷酸化
• 肝细胞癌
• 迁移
• 侵袭

目的探讨蛋白质磷酸酶4催化亚基(protein phosphatase 4 catalytic subunit, PP4C)对乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein, HBx)在蛋白质水平的调控及生物学功能的影响, 为乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)相关性肝癌提供潜在治疗靶点。方法通过免疫共沉淀(co-immunopreciptation, Co-IP)与GST pull-down试验验证HBx与PP4C在体内与体外的相互作用。采用Lipofectamine 3000试剂转染PP4C过表达真核质粒检测PP4C对HBx在蛋白质水平的影响, 并用蛋白质合成抑制剂环己酮亚胺(cycloheximide, CHX)处理过表达PP4C的肝癌细胞, Western blot检测HBx半衰期变化。磷酸化试验检测PP4C对HBx磷酸化水平的影响。CCK8增殖、细胞划痕、Matrigel侵袭小室试验检测PP4C对HBx生物学功能的影响。结果 Co-IP与GST pull-down试验证实HBx与PP4C在肝癌细胞内存在相互作用, 在体外也存在相互作用。肝癌细胞中过表达PP4C可提高HBx蛋白水平, 并明显延长HBx半衰期。磷酸化试验证实在肝癌细胞中过表达PP4C可降低HBx丝氨酸磷酸化水平。PP4C过表达对肝癌细胞的增殖没有影响, 但是促进肝癌细胞的迁移与侵袭能力。结论 HBx与PP4C的相互作用可提高HBx稳定性, 最终促进肝癌细胞的迁移与侵袭, 其机制与PP4C降低HBx丝氨酸磷酸化水平有关。本研究为发现HBx致病新机制提供理论依据, 以PP4C和HBx蛋白相互作用为靶标, 有望为HBV感染相关肝脏疾病的治疗提供有益思路。

• 单位
  基础医学院; 福建医科大学