miR-429在食管鳞癌中的表达及对细胞增殖迁移的影响

作者：花光斌^*; 朱国玺; 苏煜强

来源：中国医药生物技术, 2019, 14(01): 46-51.

• 食管肿瘤
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 微小RNA-429

目的探讨微小RNA-429(miR-429)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对细胞增殖及迁移的影响。方法选取本院45例ESCC患者手术切除的癌组织(ESCC组)及癌旁组织(正常组)标本为研究对象,并采用实时荧光定量(q RT-PCR)检测两组miR-429表达水平。体外培养ESCC癌细胞株系ECa109及人正常食管上皮细胞株Het-1A,将转染试剂、miR-429阴性对照质粒、miR-429mimic质粒分别转染ECa109细胞,命名为空白组、阴性转染组、miR-429过表达组,同时应用生物信息学工具预测miR-429的靶基因为CTl0激酶调节子样蛋白(CRKL),荧光素酶活性检测miR-429与CRKL的靶向调控关系。采用qRT-PCR法检测细胞中miR-429与CRKLmRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测细胞中CRKL蛋白表达。MTT法检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞迁移能力。结果与正常组相比,ESCC组miR-429表达水平显著降低(P<0.05);荧光素酶活性测定显示3’UTR-Wt细胞中miR-429过表达组荧光素酶活性显著低于阴性对照组(P <0.05),3’UTR-Mut细胞中miR-429阴性转染组与过表达组比较差异无统计学意义(P> 0.05);与Het-1A细胞相比,ECa109细胞中miR-429表达水平显著降低(P<0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P <0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组miR-429表达水平显著升高(P <0.05),而CRKL mRNA及蛋白表达水平显著降低(P <0.05);与空白组、阴性转染组相比,miR-429过表达组细胞增殖率及迁移数量均显著降低(P <0.05)。结论 ESCC中miR-429呈低表达,其可通过下调CRKL表达进而抑制ESCC细胞增殖及迁移。