抗盐酸克伦特罗单链抗体基因的克隆、序列分析及表达

作者：霍方珍; 卢士英; 周玉; 杨正涛; 柳增善

来源：中国兽医学报, 2007, (06): 882-886.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2007.06.026

• 盐酸克伦特罗
• 单链抗体
• 序列分析
• 表达

提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT-PCR技术,扩增VH和VL,用一段柔性肽链-(G4S)3将VH和VL连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析,所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征。将所得目的基因与pET-22b( )连接,转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,表达蛋白经SDS-PAGE分析,37℃培养5 h表达量较大,25℃诱导表达以可溶性为主。

• 单位
  吉林大学