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摘要
目的研究血清对周期性张应变作用下体外培养的成骨细胞凋亡的影响。方法酶消化法分离培养新生SD大鼠颅顶骨成骨细胞,P2-P4代成骨细胞培养4 d后,使用Flexcell 4000TM细胞应变加载系统分别对细胞施加72 h变形率为6%和12%的等轴周期性张应变,总培养时间为7 d。根据应变加载时培养液中血清加载情况分为血清组和无血清组。运用流式细胞技术对成骨细胞凋亡水平进行检测,运用ELISA技术检测caspase-3表达,运用real time RT-PCR技术检测caspase-8和caspase-9的表达。结果不加力时,血清组成骨细胞凋亡率、caspase-3活性及caspase-9的表达显著低于无血清组,caspase-8表达无显著差异。6%的周期性张应变作用下,无血清组成骨细胞凋亡水平、caspase-3活性和caspase-8表达降低,caspase-9表达无明显改变,而血清组成骨细胞凋亡水平、caspase-3活性及caspase-9表达明显低于无血清组相应细胞的各项指标。12%的周期性张应变作用下,无血清组成骨细胞凋亡水平、caspase-3活性和caspase-8表达增高,caspase-9表达无明显改变,而血清组成骨细胞凋亡水平、caspase-3活性及caspase-9表达明显低于无血清组。周期性张应变作用下,血清组和无血清组caspase-8的表达无显著差异。结论无血清状态下周期性张应变对成骨细胞的凋亡有影响。血清通过caspase-9/caspase-3途径减弱周期性张应变对成骨细胞凋亡的影响。
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单位上海市口腔病防治院; 上海交通大学医学院附属第九人民医院; 上海交通大学
