微芯片电泳结合多重PCR法在中药材水蛭品种特异性鉴定中的应用

作者：刘杰; 解盈盈; 过立农; 高妍; 昝珂; 郑健^*; 王俊丽^*; 李文静^*; 李丽潇; 黄涛宏

来源：药物分析杂志, 2020, 40(03): 429-435.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2020.03.05

• 宽体金线蛭
• 菲牛蛭
• 日本医蛭
• 聚合酶链式反应(PCR)法
• 微芯片电泳
• 特异性鉴定
• 多重PCR

目的:通过特异性引物的聚合酶链式反应(PCR)法结合微芯片电泳检测的方法,特异性鉴别宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3种水蛭品种。方法:针对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3个品种的线粒体同源序列,设计区分正伪品水蛭以及分别鉴定3个品种水蛭样品的特异性引物;通过PCR和微芯片电泳检测的方法验证所设计引物的特异性;将验证得到的特异性引物进行整合,建立3个品种的特异性引物用于三重PCR的方法。结果:确定了用于区分宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭3个品种中正伪品的特异性引物KA;确定了宽体金线蛭特异性引物KT,日本医蛭特异性引物RI,菲牛蛭特异性引物FN;建立了3种特异性引物进行三重PCR鉴别3个品种水蛭药材的方法。结论:通过特异性引物结合三重PCR的方法,可以同步鉴定宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭的人为预混样品,鉴定结果准确,且用于三重PCR的特异性引物不存在引物之间相互结合或非特异性扩增的现象。

• 单位
  山东省食品药品检验研究院; 中央民族大学; 中国食品药品检定研究院