凝胶过滤层析纯化白喉类毒素工艺的优化

作者：何岩; 张明华; 邓海清; 段霄; 李硕航; 杨朝晖; 刘建凯^*; 郑海发^*

来源：国际生物制品学杂志, 2018, 41(02).

• 白喉类毒素
• 色谱法,凝胶
• 研究设计

目的通过定制设计优化白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)层析纯化工艺。方法将经硫酸铵沉淀的精制DT原液浓缩后分别用Sepharose 4FF(4FF)和Sephacryl S-300(S-300)凝胶过滤层析进行进一步纯化。根据定制设计,将上样体积、样品浓度、洗脱流速、层析介质设为实验因子,将层析载量、纯度、收率设为响应值,建立数学模型,确定凝胶过滤层析的最优层析参数,并对实验结果进行工艺验证。结果定制设计的实验结果显示,S-300凝胶过滤层析纯化的DT纯度和收率均高于4FF凝胶过滤层析。进一步分析确定,S-300凝胶过滤层析的最佳参数为:上样体积2.5%,样品浓度45 mg/ml,洗脱流速45 cm/h。当以最佳参数进行S-300凝胶过滤层析纯化时,层析工艺的验证结果符合预期。结论 S-300比4FF更适宜作为DT纯化工艺的凝胶层析介质。

• 单位
  北京民海生物科技有限公司