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摘要
目的:人色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)是一种有效的新生血管形成抑制因子和神经营养因子。通过原核细胞表达人PEDF蛋白,鉴定其抑制新生血管的生物学活性。方法:采用PCR法扩增人PEDFcDNA,将其克隆到pET32a载体中,在大肠杆菌BL21中表达人PEDF蛋白。经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,镍柱亲和层析法变性条件下纯化重组融合蛋白。Bradford法测蛋白浓度,采用鸡胚脲囊膜法测其对新生血管形成的影响。结果:成功构建了pET32a-PEDF表达载体。重组人PEDF蛋白在BL21宿主菌中获得了稳定高效表达...
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