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摘要
目的 建立BV2小胶质细胞缺氧模型，并对12种中药单体或复方进行药物活性筛选。方法 将BV2细胞随机分为常氧组、缺氧模型组。常氧组正常培养，缺氧模型组采用缺氧培养箱建立缺氧损伤细胞模型，采用CCK-8法检测缺氧及药物作用对BV2细胞存活率的影响；流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧（ROS）水平、线粒体膜电位变化；比色法检测BV2细胞超氧化物歧化酶（SOD）含量变化；免疫荧光法检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达变化；Western印迹检测HIF-1α、帕金蛋白（Parkin）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）表达。结果 与常氧组相比，缺氧可降低BV2细胞存活率，诱导细胞发生凋亡，并促使细胞内ROS大量堆积，线粒体膜电位和SOD活力降低；同时，缺氧还可激活NLRP3/Caspase-1信号通路，促进NLRP3、caspase-1、IL-1β和HIF-1α蛋白表达，抑制Parkin蛋白表达。其中缺氧24 h组各项指标变化最为明显，故采用该条件进行后续实验。发现复方丹参滴丸干预后细胞活力回升，细胞凋亡率和ROS水平降低，线粒体膜电位水平升高。结论 BV2细胞缺氧24 h可构建稳定的缺氧模型；复方丹参滴丸对缺氧后BV2细胞具有一定的保护作用。
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