微小RNA-145-5p对结肠癌细胞增殖凋亡和FSCN1表达的影响

作者：**; 曾庆松; 王续

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(11): 999-1003.

• 结肠癌
• 微小RNA-145-5p
• 增殖凋亡
• Fascin-1

目的探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对结肠癌细胞增殖、凋亡和Fascin-1(FSCN1)表达的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常结肠上皮NCM460细胞和结肠癌HCT116细胞的miR-145-5p水平;体外常规培养HCT116细胞并分为对照组、过表达组和抑制组,过表达组转染miR-145-5p模拟物mimics,抑制组则转染miR-145-5p抑制物inhibitor,而对照组不作特殊处理。采用QPCR、活细胞计数CCK-8、AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术和Western blotting检测miR-145-5p水平、增殖活力、凋亡率和FSCN1水平;构建FSCN1基因3’端非翻译区(3’UTR)野生型和突变型重组psiCHECK2荧光素酶报告载体并通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-145-5p与FSCN1的靶向关系。结果 HCT116细胞的miR-145-5p水平为0.281±0.072,低于NCM460细胞的1.062±0.226(P<0.05)。与对照组的1.103±0.214相比,过表达组的miR-145-5p水平升高至4.159±1.080,而抑制组则降低至0.348±0.052;与对照组相比,过表达组转染48、72 h后的增殖活力降低,而抑制组则升高;与对照组的(7.539±1.413)%相比,过表达组的凋亡率升高至(17.126±4.274)%,而抑制组则降低至(2.658±0.725)%;与对照组的0.521±0.078相比,过表达组的FSCN1水平降低至0.243±0.034,而抑制组则升高至0.769±0.092;以上组间差异均有统计学意义(P<0.05)。与转染突变型FSCN1 3’UTR的荧光素酶报告载体相比,miR-145-5p mimics能降低FSCN1 3’UTR野生型的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。结论 miR-145-5p在结肠癌细胞中低表达并发挥抑癌作用,该miRNA可能通过靶向FSCN1来调控癌细胞的增殖并促进其凋亡,有望成为结肠癌的新型生物诊治靶点。

• 单位
  南阳医学高等专科学校第一附属医院