茯苓酸通过上调miR-133a影响子宫肌瘤细胞增殖凋亡及表皮生长因子的水平

作者：王佳; 梁葵香; 刘艳妮; 杨延冬^*

来源：中国免疫学杂志, 2020, 36(09): 1069-1074.

• 茯苓酸
• miR-133a
• 子宫肌瘤
• 增殖
• 凋亡
• EGF
• EGFR

目的:探讨茯苓酸(PA)对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及表皮生长因子(EGF)水平的影响。方法:选取58例子宫肌瘤患者的子宫肌瘤组织进行细胞原代培养。将子宫肌瘤细胞分为NC组、PA 10μg/ml组、PA 20μg/ml组、PA 40μg/ml组、PA 80μg/ml组。采用甲基噻唑基四唑(MTT)检测各组细胞存活率,筛选PA适宜浓度进行后续实验。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测PA对EGF水平的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PA对表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PA对细胞中微小RNA-133a(miR-133a)表达水平的影响。miR-133a mimics及阴性对照miR-NC转染至子宫肌瘤细胞,观察miR-133a过表达对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及EGF、EGFR表达水平的影响。Western blot检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)蛋白表达。结果:与NC组比较,PA 10μg/ml组、PA 20μg/ml组、PA 40μg/ml组、PA 80μg/ml组细胞存活率均显著降低(P<0.05),选用PA 40μg/ml作为后续研究。与NC组比较,PA组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),C-caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),EGFR蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而EGF水平显著降低(P<0.05);与NC组比较,PA组细胞中miR-133a的表达水平显著升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-133a组细胞存活率显著降低(P<0.05),CyclinD1、EGFR蛋白表达水平显著降低(P<0.05),EGF水平显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著升高(P<0.05),C-caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。抑制miR-133a的表达可逆转PA对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及EGF的影响。结论:PA可通过上调miR-133a的表达抑制子宫肌瘤细胞增殖并促进细胞凋亡,同时降低EGF、EGFR表达水平。

• 单位
  滨州医学院附属医院