摘要

[目的]探究嗜热厌氧杆菌Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27(SCUT27)木糖代谢途径的调控机制,强化葡萄糖和木糖共利用。[方法]通过q PCR、RT-PCR对木糖代谢相关基因xyl A、xyl B和xyl T的共转录及功能进行验证,然后利用基因敲除技术构建rok、lac I和mtlR的敲除菌,以探究其对木糖代谢的调控,最后构建mtlR的过表达菌株,强化葡萄糖和木糖的共利用。[结果]RT-PCR结果显示xyl A、xyl B和xyl T共转录;敲除xyl AB后,木糖利用能力下降83.72%;当敲除rok和lac I后,木糖利用能力变化不显著;敲除mtlR后,木糖利用能力下降67.56%,xyl AB和xyl T的转录水平分别下降约39.67%和86.93%。过表达mtlR后,xyl AB的转录水平提高约44.75%,木糖利用能力提高25.71%。[结论]转录因子MtlR是SCUT27木糖代谢的正调控因子,过表达mtlR可强化SCUT27的葡萄糖和木糖共利用。

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