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摘要
目的:建立基于小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬及分泌功能的清金化痰汤水提物冻干粉生物限值测定方法,从生物活性层面对清金化痰汤进行质量控制。方法:建立巨噬细胞RAW264.7吞噬模型和炎症模型,以清金化痰汤水提物冻干粉对巨噬细胞RAW264.7吞噬指数和白细胞介素-6(IL-6)分泌量的抑制率为指标,考察清金化痰汤水提物冻干粉的生物活性,并寻找生物限值。结果:巨噬细胞优选接种密度为3×105个/mL,药物作用时间24 h,脂多糖(LPS)质量浓度1 mg·L-1;当清金化痰汤水提物冻干粉质量浓度为500 mg·L-1时,对RAW264.7巨噬细胞既无毒性也无明显促增殖作用,在此浓度下,对RAW264.7巨噬细胞吞噬中性红有明显促进作用,吞噬指数均>113%,且对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6呈现出显著且稳定的抑制作用,抑制率>45%。结论:结合清金化痰汤抗炎及免疫调节的药理活性,建立了基于RAW264.7巨噬细胞吞噬及分泌功能的生物限值评价方法,在设定的实验条件下,确定500 mg·L-1为限值浓度,在该限值浓度下,清金化痰汤水提物对巨噬细胞的吞噬指数有明显的促进作用或对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞IL-6的分泌量有明显抑制作用,均可判断为质量合格。
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