结缔组织生长因子和金属蛋白酶组织抑制因子-1 RNA干扰靶位的筛选

作者：蒋玉凤; 黄飞; 张建军; 刘加群; 孙华丽

来源：实用肝脏病杂志, 2011, (04): 246-248+252.

• 肝纤维化
• 结缔组织生长因子
• 金属蛋白酶组织抑制因子-1
• 肝星状细胞
• RNA干扰 Hepatic fibrosis
• Connective tissue growth factor
• Tissue inhibitor of metalloproteinase-1
• Hepatic stellate cell
• RNA interference

目的筛选能有效抑制肝纤维化形成的结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的RNA干扰靶位。方法根据大鼠CTGF和TIMP-1基因序列,分别设计3个RNA干扰候选靶位,化学合成双链RNA(dsRNA),各自转染或不同组合后转染经TGF-β1刺激活化的大鼠肝星状细胞(HSC),48h后抽提RNA并逆转录成cDNA,采用荧光定量PCR法测定并计算CTGF和TIMP-1、Ⅰ型前胶原(procol-α1)mRNA的相对表达量与抑制率,采用RIA法检测HSC培养上清液肝纤维化指标。结果在进行单独针对CTGF基因干扰时,CTGF-3组对CTGF mRNA及其下游产物Proco...

• 单位
  泸州医学院附属医院; 荆州市中心医院