中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究

作者：乔军; 孟庆玲; 陈创夫; 才学鹏; 刘佳旭; 任艳; 张辉

来源：江苏农业科学, 2009, (04): 39-42.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2009.04.137

• 白介素-18基因
• 克隆
• 真核表达
• 中国荷斯坦奶牛

为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达。结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 动物科技学院; 石河子大学