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摘要
目的建立BRL-3A细胞系胰岛素抵抗模型,筛选棕榈酸诱导的最佳条件,并探究其作用机制。方法采用CCK8法确定棕榈酸对BRL-3A细胞增殖的影响;采用葡萄糖检测试剂盒检测葡萄糖含量,确定不同浓度的棕榈酸对BRL-3A细胞摄取葡萄糖的影响;采用免疫印迹法(Western blotting)检测胰岛素受体底物1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3’-羟基激酶(PI3K)、磷酸化丝氨酸-苏氨酸激酶(p-AKT)、丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的蛋白表达。结果 0.2 mmol·L-1棕榈酸作用36 h对BRL-3A细胞增殖无影响;0.4 mmol·L-1棕榈酸诱导6 h、0.25和0.2 mmol·L-1棕榈酸诱导12 h, BRL-3A细胞开始出现明显胰岛素抵抗,移除刺激后48 h内仍然能够抑制胰岛素刺激状态下的糖消耗;在蛋白水平,棕榈酸降低了IRS-1、PI3K、p-AKT、GLUT4在BRL-3A细胞内的表达。结论高浓度棕榈酸能够通过抑制IRS-1等靶蛋白表达诱导BRL-3A细胞产生胰岛素抵抗。
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单位中国人民解放军空军军医大学; 基础医学院
