侧向流动型重组酶聚合酶扩增技术检测食品中大肠埃希氏菌O157

作者：兰全学; 陈佳平; 杨慧; 甘莉萍; 杜文旗; 刘渠; 金玉娟

来源：食品科技, 2021, 46(01): 302-307.

DOI：10.13684/j.cnki.spkj.2021.01.049

• 重组酶聚合酶扩增
• 侧向流动免疫分析
• 大肠埃希氏菌O157
• rfbE基因

研究内容基于侧向流动型重组酶聚合酶扩增(Lateral flow-based recombinase polymerase amplification,LF-RPA)技术原理,建立大肠埃希氏菌O157(Escherichia coli O157)的LF-RPA快速检测方法。应用该方法对3株大肠埃希氏菌O157和27株非大肠埃希氏菌O157进行检测,结果表明该方法具有良好的特异性。分别以10倍浓度梯度稀释插入靶基因序列的质粒pUC57-rfbE和大肠埃希氏菌O157菌液DNA作为模板进行LF-RPA检测。结果表明LF-RPA方法可检出1.0×102拷贝/μL的pUC57-rfbE质粒和1.2×104 cfu/mL的大肠埃希氏菌O157菌液。以大肠埃希氏菌O157污染食品样品,增菌4 h后,大肠埃希氏菌O157初始浓度为1.2×101 cfu/mL的食品增菌液可以被LF-RPA检出阳性信号。该研究建立的方法可快速、准确、灵敏地检测食品中大肠埃希氏菌O157,无需专业设备,在食品生产企业和基层检测机构具有一定的应用前景。

• 单位
  深圳市龙岗区疾病预防控制中心; 深圳市计量质量检测研究院