环状RNA hsacirc0067582对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响

作者：陆蓉丹; 黄哲; 陆佳敏; 张海强; 邵永富^*

来源：中国医学科学院学报, 2022, 44(01): 81-90.

• 环状RNA
• hsa＿circ＿0067582
• 胃癌
• 增殖
• 侵袭
• AGS细胞
• SGC-7901细胞

目的 探讨hsa＿circ＿0067582在胃癌细胞中的表达水平及其对细胞增殖和侵袭能力的影响，并研究hsa＿circ＿0067582在胃癌中的作用机制。方法 hsa＿circ＿0067582过表达(Oe-circ＿0067582)质粒分别转染人胃癌AGS和SGC-7901细胞，CCK-8检测细胞活力情况，细胞克隆形成实验及EdU实验检测细胞增殖；Transwell实验检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测凋亡及上皮间质转换(EMT)相关蛋白的表达情况，并通过异种移植瘤实验观察Oe-circ＿0067582对裸鼠体内SGC-7901细胞生长的影响。生物信息学方法预测hsa＿circ＿0067582结合的微小RNA(miRNA),并构建竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络；对miRNA靶基因进行功能学分析。结果 与pLO-ciR组相比，Oe-circ＿0067582组的AGS和SGC-7901的细胞活力(t=7.883,P=0.001;t=5.679,P=0.005)、增殖(t=6.709,P=0.003;t=5.857,P=0.003)及侵袭能力(t=7.782,P=0.002;t=6.342,P=0.003)均明显降低，并诱导细胞凋亡(t=7.225,P=0.002;t=11.509,P=0.001)。Western blot结果显示，Oe-circ＿0067582组的AGS和SGC-7901细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3(t=6.863,P=0.002;t=7.024,P=0.001)、Caspase 7(t=3.295,P=0.04;t=6.008,P=0.004)、Caspase 9(t=4.408,P=0.012;t=6.278,P=0.004)和E-钙黏蛋白(t=12.453,P=0.002;t=10.867,P=0.001)蛋白表达水平均明显升高，而波形蛋白(t=7.242,P=0.002;t=5.694,P=0.004)和N-钙黏蛋白(t=6.480,P=0.003;t=7.446,P=0.001)蛋白表达水平明显降低。Oe-circ＿0067582抑制SGC-7901荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长(t=3.526,P=0.017)。根据TargetScan及miRnada数据库获知hsa＿circ＿0067582可竞争性地结合hsa-miR-181b-3p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-421和hsa-miR-548d-3p。功能富集结果表明miRNA靶基因涉及癌症相关的多个生物学过程，包括细胞凋亡负调控、基因表达、癌症中的转录失调、转化生长因子-β、p53信号通路等。结论 Oe-circ＿0067582抑制胃癌AGS和SGC-7901细胞增殖，并可能通过减弱EMT进程降低胃癌细胞侵袭能力，为胃癌的预防及治疗提供了新的靶点。

• 单位
  宁波大学医学院附属医院