人DRR1真核表达载体和稳定转染HEK293细胞株的建立及鉴定

作者：赵新宇; 聂春来; 袁铸

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (09): 972-974.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006156

• DRR1
• 肿瘤抑制基因
• 肿瘤发生
• 串联亲和纯化

目的:构建人DRR1基因的真核表达载体,通过转染HEK293细胞建立稳定的DRR1表达细胞株。方法:通过改造质粒pIRES,在其MCS1和MCS2中分别引入串联亲和纯化标签和绿色荧光蛋白基因,形成一个新的表达质粒pFSIG。将PCR扩增的DRR1基因插入pFSIG中进行酶切和测序验证。用重组质粒pFSIG-DRR1转染HEK293细胞,通过G418和绿色荧光检测筛选DRR1稳定表达细胞株。通过W esternb lot鉴定FS-DRR1蛋白的表达。结果:酶切、PCR和测序证实成功构建了pFSIG-DRR1表达质粒;建立了稳定转染的HEK293细胞系,W estern b lot检测证明重组DR...

• 单位
  四川大学; 生物治疗国家重点实验室